Santoni começou sua carreira no teatro Off-Broadway e como escritor de comédia. No início dos anos 1960 passou para o cinema, sem nunca conseguir se firmar como ator principal.
Sua filmografia conta 25 filmes, entre os quais estão "A Batalha de Anzio" (Lo sbarco di Anzio, Itália/EUA, 1968), "A Revolta dos Sete Homens" (Guns of the Magnificent Seven, 1969), "Perseguidor Implacável" (Dirty Harry, 1971), "Cliente Morto Não Paga" (Dead Men Don't Wear Plaid, 1982), "Chuva de Milhões" (Brewster's Millions, 1985), "Stallone - Cobra" (Cobra, EUA/Israel, 1986) e "O Rei da Baixaria" (Private Parts, 1997).
Reni Santoni nasceu em 21 de abril de 1939, em Nova York, Nova York, EUA. Foi casado com a atriz Lisa James e, subsequentemente, teve um longo relacionamento com a atriz e diretora Betty Thomas. Tinha um filho.